赛默飞ProFlex3 x 32 PCR热循环仪操作指南

在追求高效、精确的分子生物学研究中，一台性能稳定的PCR仪是实验室的核心设备。赛默飞世尔科技（Thermo Fisher Scientific）推出的ProFlex3 x 32 PCR热循环仪 ，以其三区独立温控与32孔高通量设计，成为众多科研与检测实验室提升效率的选择。以下为您详细介绍其安全、规范的操作流程，助您轻松驾驭这台高性能仪器。

核心优势：

三区独立温控： 三个独立温控模块，支持运行不同程序或优化梯度实验。

超大32孔容量： 单次运行可处理32个样本，显著提升实验通量。

温度均一性： 优化的热盖与模块设计，确保孔间温差≤±0.25°C。

灵活梯度功能： 单模块内实现12列不同退火温度优化。

智能热盖压力调节： 自动适应不同耗材，密封更可靠。

ProFlex3 x 32 PCR热循环仪标准操作流程：

一、 开机与准备

仪器安置： 确保仪器放置于平稳、干燥、通风良好的实验台面，远离热源、震动源及腐蚀性物质。连接电源线。

开机自检： 打开仪器主电源开关（通常位于背面或侧面）。仪器启动，屏幕亮起，自动进行初始化及自检（约需1-2分钟）。

模块安装/确认： 如需更换模块（如由0.2ml模块更换为0.5ml模块），请遵循用户手册安全操作，确保模块正确卡入并锁定到位。日常使用确认当前模块符合实验需求。

预热/预冷（可选）： 如需快速达到设定起始温度（如4°C预冷或高温启动），可在主界面选择“Preheat"或“Precool"功能设定目标温度启动。

二、 样品准备与反应体系构建

耗材选择： 根据实验需求选择经认证兼容 的0.2ml或0.5ml PCR管/板。

反应体系配制： 在洁净的实验区域（推荐超净台或冰盒上），严格按照实验方案配制PCR反应混合液。确保各组分混合均匀（可用移液器轻轻吹打或短暂离心）。

分装样品： 将配制好的反应液分装至选定的PCR管或PCR板孔中。推荐使用光学透明盖或专用封板膜密封，确保密封良好防止蒸发。

样品装载：

将装有样品的PCR管或板轻稳 地放入模块对应的孔位中。

注意：若使用0.2ml管，确保管盖整体闭合，且未突出模块边缘 ，否则可能影响热盖压紧和温度传导。

确保样品放置平整。

三、 程序编辑/调用与运行设置

新建/编辑程序：

在主界面选择“Protocol Editor"。

输入程序名称。

按步骤添加所需温控阶段：变性 (Denaturation) 、 退火 (Annealing) 、 延伸 (Extension) 、 循环次数 (Number of Cycles) 、 终延伸 (Final Extension) 、 保温 (Hold) 。

为每个阶段精确设置温度 (°C) 、持续时间 (Time: 小时:分:秒) 。

善用梯度 (Gradient) 功能：在特定阶段（通常是退火阶段），可设置跨越一定温度范围（如50°C - 65°C），仪器将在单行（X轴）上自动实现12种不同温度的梯度优化。

设置热盖温度 (Heated Lid) ：通常设置为105°C（推荐用于0.2ml管）或115°C（推荐用于0.5ml管及板）。此功能至关重要，可防止管盖冷凝。

设置反应体系体积 (Reaction Volume) ：告知仪器体积信息，有助于优化温度控制算法。

调用已有程序： 若使用标准程序，可在“Saved Protocols"列表中选择所需程序。

运行设置： 在准备好程序后，返回主界面。确认样品已装载无误。选择目标程序，按“Start"或“Run"键启动运行。屏幕显示运行状态（当前阶段、温度、剩余时间等）。

四、 运行监控与应急处理

实时监控： 运行过程中，可通过仪器屏幕实时查看各模块的温度曲线、当前阶段及剩余时间等信息。

暂停/停止： 如遇特殊情况需暂停，可按“Pause"键（再次按“Start"继续）。紧急情况下可直接按“Stop"键终止运行（谨慎使用）。

异常处理： 若仪器报警（如温度错误、热盖错误等），请立即查看屏幕提示信息，并参照用户手册进行故障排查。

五、 运行结束与样品取出

运行完成： 当程序执行完毕，仪器发出提示音，屏幕显示“Run Complete"或类似信息。

降温等待： 程序结束后，热盖温度会维持设定值一段时间后开始降温，模块则开始降温至设定的保温温度或室温。请勿立即打开热盖！ 内部高温蒸汽可能造成烫伤。

安全开盖：

确认模块温度已降至安全范围（如< 60°C，具体参考手册），且热盖温度已明显降低（可通过屏幕查看）。

戴好防烫手套（推荐）。

按下热盖打开按钮或手柄，缓慢抬起热盖 ，让内部热蒸汽散开。

取出样品： 使用移液器或镊子小心取出PCR管或板。注意样品仍可能很热 。立即将样品置于冰上冷却或进行后续实验步骤。

六、 关机与日常维护

关机： 日常使用后，若短时间内不再使用，可在主界面选择关机选项（如“Shut Down"），按提示操作。或直接关闭仪器背部电源开关。

清洁：

热盖清洁： 待仪器整体冷却后 ，使用无尘棉签 沾取少量蒸馏水或70%乙醇 ，轻柔擦拭 热盖底面（Thermal Pad）。切勿使用有机溶剂或硬物刮擦。

模块清洁： 使用无尘棉签 或压缩空气 清除模块孔位内灰尘或微小残留物。严禁将液体直接倒入模块孔内。

外壳清洁： 用柔软微湿 的布（可蘸少量温和清洁剂）擦拭仪器外壳和屏幕，然后用干布擦干。禁止水流进入仪器内部 。

定期维护： 建议按照维护计划或定期（如每6-12个月）由专业工程师进行校准和深度维护，确保仪器性能最佳。

操作安全关键点：

温度警示： 运行中及运行后短时间内，仪器模块、热盖及样品温度高 ，操作时务必佩戴防热手套，严格按规程等待降温后才可开盖取样。

生物安全： 处理潜在生物危害性样品时，务必在符合安全等级的实验室进行，使用带滤芯的吸头，并在实验后对仪器接触表面进行整体消毒（按实验室安全规程）。

电源安全： 确保电源接地良好，避免液体溅洒到仪器及电源线上。清洁时务必断电。

耗材兼容： 仅使用 赛默飞认证或明确兼容的PCR耗材。使用不当耗材可能导致密封不良、温度传导不佳甚至破裂污染模块。

选择ProFlex3 x 32，选择高效与可靠

赛默飞ProFlex3 x 32 PCR热循环仪凭借其三区独立运行能力、32样本高通量和精确稳定的温度控制，为基因扩增、基因分型、克隆测序等关键实验提供强大支持。其直观的操作界面和灵活的程序设置，让复杂的实验流程变得简单高效。