伯乐 iQ-Check 弯曲杆菌 PCR 试剂盒关键使用要点与解决方案

选择伯乐 iQ-Check 弯曲杆菌实时荧光定量 PCR 检测试剂盒，意味着您已采用食源性致病菌监控。为确保检测结果准确可靠、流程顺畅高效，我们总结了关键使用注意事项及针对性解决方案，助您发挥试剂盒性能。

核心注意事项与专业解决方案

1. 样本前处理：消除抑制物干扰

注意点：

食品样本（尤其高脂/高蛋白基质如禽肉、乳制品）或环境样本中可能含有 PCR 抑制物（如脂肪、腐殖酸、清洁剂残留），影响核酸提取效率与扩增效果。

解决方案：

严格遵循配套方案： 使用伯乐验证推荐的 自动化核酸提取试剂盒及平台 （如 Aurum™ 系列），其优化裂解与纯化步骤能有效去除绝大多数抑制物。

样本均质标准化： 确保样本按说明书要求充分均质，控制取样量，避免基质过载。

利用内源对照监控： 试剂盒内置 Internal Control 实时监控每一步骤。若 IC 信号异常（如 Ct 值延迟），提示存在抑制或提取问题，需复查前处理流程。

2. 避免交叉污染：保障结果特异性

注意点：

PCR 技术灵敏度高，实验环境或操作中的交叉污染可能导致假阳性结果。

解决方案：

分区操作： 严格执行 试剂配制区、样本处理区、扩增分析区 三区物理分离，使用独立移液器与耗材。

防污染设计： 使用含 dUTP/UDG 防污染系统 的预混液（iQ-Check 系列标配），可降解既往扩增产物，杜绝残留污染。

阴性对照设置： 每批次检测必须包含 提取阴性对照 和 PCR 阴性对照 ，监控环境与试剂本底。

3. 设备适配与程序优化：确保扩增效率

注意点：

非推荐机型或错误程序设置可能导致扩增效率下降、灵敏度降低。

解决方案：

兼容设备： 强烈推荐搭配伯乐 CFX Opus 系列实时荧光定量 PCR 仪 。仪器内置经过验证的预置程序，一键启动标准化检测流程。

参数勿随意修改： 若使用其他品牌仪器，严格参照说明书要求设置退火/延伸温度与时间，避免自行调整循环参数。

定期校准维护： 按厂商指南对 PCR 仪进行光学校准与热循环性能验证。

4. 试剂保存与稳定性：维持最佳性能

注意点：

反复冻融、高温或光照可能降低酶活性，影响检测限。

解决方案：

规范储存： 未开封试剂盒按要求 -15°C 至 -25°C 冷冻避光保存 。解冻后预混液建议分装使用，避免 >4 次冻融循环。

即用即取： 配制反应液时，试剂置于冰上操作。完成分装后立即放回低温环境。

批次记录： 清晰标记试剂开瓶日期与冻融次数，过期勿用。

5. 结果判读与验证：提升数据可靠性

注意点：

弱阳性样本（Ct 值接近cut-off）或曲线异常需谨慎判读。

解决方案：

双重复检测： 对临界值样本或异常曲线进行 重复检测 ，确认结果重现性。

结合内对照： 确保 Internal Control Ct 值在有效范围内（参考说明书），否则结果无效需重提核酸。

阳性对照验证： 每批次必须包含 试剂盒提供阳性对照 ，确认整个检测体系有效性。

为何选择 iQ-Check 方案能规避常见风险？

一体化解决方案： 从核酸提取到扩增分析，伯乐提供 经系统验证的配套产品组合 ，减少兼容性风险。

智能分析软件： CFX Maestro™ 软件自动分析扩增曲线，内置算法识别异常，减少人为误判。

全球验证背书： 试剂盒通过 AOAC-RI、AFNOR 等国际认证 ，性能参数经严格评估，确保方法稳健性。

专业技术支持： 伯乐提供全周期应用支持，包括方案优化、故障排查与人员培训。