赛默飞细胞计数仪countess3使用过程中需要注意哪些问题？

在生命科学研究、生物制药开发及细胞治疗等前沿领域，准确的细胞计数 是实验成功的关键基石。赛默飞世尔科技旗下的Countess 3自动细胞计数仪 ，以其便捷操作、快速分析 和精准结果 ，已成为众多实验室提升效率的工具。为了帮助您充分发挥Countess 3的性能优势，确保每一次计数结果都稳定可靠 ，我们总结了在使用过程中需要特别注意的关键事项，助您轻松驾驭实验流程。

一、 样本制备阶段：奠定精准计数基础

细胞悬液均一性是核心：

均匀混匀： 在取样前，务必充分混匀您的细胞悬液。剧烈的涡旋振荡或反复吹打（避免产生过多气泡）是确保细胞均匀分布 的关键。不均匀的样本会导致计数区域细胞密度差异大，影响结果的准确性 。

避免结团： 确保细胞处于良好的单细胞悬液 状态。明显的细胞团块会影响仪器的自动识别精度 。对于容易结团的细胞，可考虑使用温和的解离试剂 或优化制备流程。

排除气泡干扰： 移液或混匀时尽量避免引入气泡。气泡在计数腔中会被误识别为细胞，导致计数结果虚高 。

选择匹配的计数板/玻片：

专用耗材： Countess 3设计使用特定的一次性计数板（Countess Cell Counting Chamber Slides） 。务必使用原厂或认证兼容的耗材，确保其光学特性和腔体尺寸与仪器的自动对焦 和成像系统 匹配，这是获得清晰图像 和精确结果 的前提。

正确加样： 按照说明将适量（通常10μL）的细胞悬液准确加入到计数板的加样孔中。避免加样不足或溢出，影响成像质量。

染料选择与使用（如适用）：

台盼蓝染色： 用于活/死细胞鉴别 时，需确保台盼蓝染料与细胞充分混合，并在推荐时间内（通常1-2分钟）完成计数，避免染色时间过长影响细胞状态或死细胞比例。

荧光染色： 若使用Countess 3 FL型号的双荧光通道 进行更复杂的分析（如特定细胞群计数、转染效率分析），需严格按照试剂说明进行染色、避光孵育，并确保染料与仪器兼容。

二、 仪器操作阶段：确保流程顺畅无误

仪器启动与环境准备：

稳定放置： 将Countess 3放置在稳定、水平的台面 上，避免震动影响自动对焦和成像清晰度。

清洁维护： 定期使用柔软、无绒的干布 清洁仪器的蓝色载物台表面 和光学窗口 （避免使用有机溶剂或研磨剂）。保持光学部件清洁是获取高质量图像 的基础。

开机预热（如需要）： 遵循说明书建议，部分情况下短暂开机预热有助于系统稳定。

软件设置与参数优化：

选择正确应用： Countess 3内置多种预设应用（如哺乳动物细胞、酵母、台盼蓝计数、荧光计数等）。根据您的样本类型准确选择对应的应用，软件会自动调用优化的分析算法 和参数设置 。

自定义设置（进阶）： 对于特殊样本或特定需求，可进入高级设置微调细胞大小范围、灵敏度、对比度 等参数，但建议在熟悉仪器性能后进行，或参考技术资料。

聚焦是关键： Countess 3的智能自动对焦 功能强大。确保计数板正确放置后，让仪器自动完成对焦。如果自动对焦遇到困难（如样本非常稀或浓），可尝试手动微调（若支持）或检查样本/计数板。

样本加载与运行：

轻柔插入： 将加好样的计数板平稳、轻柔 地滑入仪器插槽，避免剧烈动作导致样本移位或产生气泡。

启动分析： 在软件界面确认设置后，点击计数按钮。Countess 3会在数秒内 完成快速成像 和智能分析 。

三、 结果解读与后续维护：

结果判读与验证：

查看图像： 务必查看分析后的细胞图像 。检查图像是否清晰，细胞边界是否分明，自动识别的标记（绿框活细胞，红框死细胞等）是否准确覆盖目标细胞。这是判断计数结果可信度 的重要步骤。

关注关键数据： Countess 3会提供总细胞浓度、活细胞浓度、存活率、平均细胞直径 等结果。理解这些参数的含义及其对您实验的意义。

异常结果处理： 如果结果异常（如存活率异常高/低、浓度与预期不符），首先回顾上述注意事项（样本混匀、染色、参数设置等），必要时重复实验。对照手工计数 （如血球计数板）有助于在初期验证仪器准确性。

数据管理与导出：

保存结果： Countess 3软件支持将带图像的分析结果保存为报告或导出数据 （如CSV格式），方便记录、追溯和分析。

遵守规范： 遵循实验室的数据管理和记录保存规范。

仪器保养与耗材管理：

定期清洁： 如前述，保持光学部件和载物台清洁。

妥善存放： 不使用仪器时，可拔掉电源或用防尘罩遮盖。

耗材储备： 确保有充足的一次性计数板 库存，避免实验中断。妥善储存耗材（避免高温高湿）。

选择Countess 3，选择高效精准的细胞分析体验

通过关注以上关键注意事项，您可以大程度地保障赛默飞Countess 3自动细胞计数仪的性能表现 和结果可靠性 。其直观的用户界面 、快速的分析速度 和智能的算法 ，结合您规范的操作，将显著提升实验室的细胞计数效率 ，为下游实验提供坚实的数据支撑。